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求助QPCR擴(kuò)增效率的影響因素

主要考慮是否在模板稀釋過程中出現(xiàn)問題，是否存在高濃度樣品污染低濃度樣品的情況。具體的要看擴(kuò)增曲線、溶解曲線以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的結(jié)果才能判斷。其次題主提到的兩個(gè)問題。模板濃度過高會抑制PCR反應(yīng)，可能會導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低。但同時(shí)可能會出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致結(jié)果的Ct值不可信，最終導(dǎo)致擴(kuò)增效率不可信。在一定范圍內(nèi)提高退火溫度不會太影響擴(kuò)增效率。

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導(dǎo)讀主要考慮是否在模板稀釋過程中出現(xiàn)問題，是否存在高濃度樣品污染低濃度樣品的情況。具體的要看擴(kuò)增曲線、溶解曲線以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的結(jié)果才能判斷。其次題主提到的兩個(gè)問題。模板濃度過高會抑制PCR反應(yīng)，可能會導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低。但同時(shí)可能會出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致結(jié)果的Ct值不可信，最終導(dǎo)致擴(kuò)增效率不可信。在一定范圍內(nèi)提高退火溫度不會太影響擴(kuò)增效率。